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中國(guó)科學(xué)家領(lǐng)銜完成的一項(xiàng)最新研究——成功建立可支持食蟹猴胚胎體外發(fā)育至受精后第25天的3D長(zhǎng)時(shí)程培養(yǎng)體系,揭示靈長(zhǎng)類早期神經(jīng)胚發(fā)育特征,在已有研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步填補(bǔ)了靈長(zhǎng)類胚胎中晚期原腸運(yùn)動(dòng)至早期器官發(fā)育階段的領(lǐng)域空白。
這項(xiàng)靈長(zhǎng)類胚胎發(fā)育領(lǐng)域重要突破進(jìn)展的論文,由中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所(中科院動(dòng)物所)/北京干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)研究院王紅梅、郭帆、李偉研究員聯(lián)合美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)尼古拉斯·普拉切塔(Nicolas Plachta)教授合作完成。中科院動(dòng)物所副研究員翟晶磊、助理研究員萬海峰和博士生徐艷紅、燕蕊、郭敬以及美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)博士后羅賓·斯科里(Robin Skory)為論文共同第一作者。論文于北京時(shí)間5月11日夜間在國(guó)際著名學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》(Cell)以封面形式在線發(fā)表。
研究團(tuán)隊(duì)指出,出生缺陷的發(fā)生與早期胚胎發(fā)育異常直接相關(guān)。因此研究早期胚胎發(fā)育過程、探究發(fā)育機(jī)理,是揭示病理性胚胎發(fā)生機(jī)制、提升相關(guān)疾病診療效率,進(jìn)而從根源上提高人民健康水平的重要前提。但人類早期胚胎極難獲取,科學(xué)家們無法直接探究人類胚胎發(fā)育過程和機(jī)理。胚胎體外培養(yǎng)技術(shù)是可視化研究胚胎發(fā)育過程的有力工具。借助人類胚胎體外培養(yǎng)技術(shù),胚胎期第14天之前的發(fā)育事件已被初步揭示。然而,由于科研倫理限制,人類胚胎研究遵循“14天原則”,即人類胚胎體外研究必須在第14天終止,故體外培養(yǎng)的人類胚胎不能被用于研究胚胎期第14天之后發(fā)生的原腸運(yùn)動(dòng)和早期神經(jīng)胚發(fā)育等事件。
非人靈長(zhǎng)類與人類在進(jìn)化上和發(fā)育生物學(xué)特征上高度相似,所以搭建非人靈長(zhǎng)類胚胎體外培養(yǎng)體系至關(guān)重要,借此揭示靈長(zhǎng)類胚胎發(fā)育特征,可極大提升科學(xué)家們對(duì)包括人類在內(nèi)的靈長(zhǎng)類早期胚胎發(fā)育及相關(guān)疾病的認(rèn)識(shí)。
2019年,王紅梅研究員團(tuán)隊(duì)聯(lián)合中外同行已將食蟹猴胚胎體外培養(yǎng)至胚胎期第20天,探究了靈長(zhǎng)類早期原腸運(yùn)動(dòng)特征。本次研究在之前基礎(chǔ)上再獲突破,把食蟹猴胚胎體外培養(yǎng)至胚胎期第25天,并命名為3D長(zhǎng)時(shí)程培養(yǎng)體系(pIVC)。
利用該體系,研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步探究靈長(zhǎng)類早期神經(jīng)胚發(fā)育過程。研究者對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育關(guān)鍵調(diào)控因子進(jìn)行鑒定,發(fā)現(xiàn)pIVC胚胎的神經(jīng)管形態(tài)和多種分子表達(dá)特征與體內(nèi)相同發(fā)育階段的胚胎相似。伴隨神經(jīng)外胚層的發(fā)育,pIVC胚胎的表皮和神經(jīng)板邊緣的發(fā)育同步進(jìn)行,同時(shí)pIVC胚胎可重現(xiàn)神經(jīng)管沿背腹軸區(qū)域化發(fā)育的模式,并分化出早期運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元祖細(xì)胞。
除外胚層和神經(jīng)管發(fā)育外,研究團(tuán)隊(duì)還檢測(cè)了pIVC胚胎中原始生殖細(xì)胞和中、內(nèi)胚層的發(fā)育特征。結(jié)果提示與相同發(fā)育階段的體內(nèi)正常胚胎相比,pIVC胚胎的分子表達(dá)特征與正常胚胎相似,表明前者可重現(xiàn)原腸運(yùn)動(dòng)中晚期階段中胚層和內(nèi)胚層的發(fā)育。
研究團(tuán)隊(duì)還利用單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序技術(shù),對(duì)9個(gè)pIVC胚胎的單細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和DNA甲基化和染色質(zhì)可及性進(jìn)行測(cè)序和分析。結(jié)果提示,各種細(xì)胞類型的基因均發(fā)生了甲基化,且胚胎組織的DNA甲基化水平(約75%)高于胚外組織(約50%),與已報(bào)道的小鼠和人類胚胎特征相似。
研究團(tuán)隊(duì)總結(jié)認(rèn)為,他們這次的最新研究成果,既為靈長(zhǎng)類胚胎體外培養(yǎng)和基于干細(xì)胞構(gòu)建的“類胚胎”的體外培養(yǎng)提供參考體系,也為深入了解人類早期胚胎發(fā)育機(jī)制,以及早期胚胎發(fā)育異常相關(guān)疾病的病理研究等提供重要技術(shù)平臺(tái)。
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